Bağışıklık sisteminin işleyişi daha net hale geldikçe, araştırmacılar hücresel mimariye ilişkin içgörü sağlayan devrim niteliğinde teknolojiler geliştiriyorlar. Bunlar hücre yapısını öğrenmenin yanı sıra yeni tıbbi uygulamalarda kullanılan tekniklerdir. Böyle bir teknikte, araştırmacılar, antikorları belirli bir hücre tipindeki bir antijen bölgesine, hücre içindeki belirli bir yapıya veya belirli bir başka maddeye spesifik olarak bağlanan lenfositlerin içinden tek bir lenfosit türü – genellikle B lenfositleri – seçerek klonladılar. Bir monoklonal antikor tekniği olarak tanımlanan bu yöntem, bir hücredeki tüm tübülin veya sodyum potasyum pompalarını, mitokondriyal Fl komplekslerini ve RNA polimerazları konumlandırmak için kullanılabilir. Bu paha biçilmez tekniği pek çok açıdan geliştiren bilim adamları, Cambridge’deki İngiliz Tıbbi Araştırma Konseyi’nden César Milstein ve Basel İmmünoloji Enstitüsü’nden Georg JF Kohler, çalışmalarından dolayı 1984 yılında Nobel Ödülü ile onurlandırıldılar.
Belirli bir maddeye özgü bir antikor klonu elde etmek için, araştırmacılar önce o maddeyi kimyasal veya hücre ile birlikte bir fareye enjekte ederler. Kısa sürede, farede, yabancı hücre veya kimyasal üzerindeki birçok farklı antijene özgü çeşitli antikorlar üreten B lenfositlerinin sayısında belirgin bir artış olur. Bu lenfositlerin büyük çoğunluğu, birçok farklı hücreye veya yabancı kimyasallara özgü çeşitli antikorlar üretecektir, ancak bunların birkaçı tesadüfen, yalnızca enjekte edilen yabancı maddeye özgü antikorlar üretecek olan lenfositler olacaktır. Keşke bu lenfositler, lenfosit havuzundan seçilebilseydi ve fareden alınıp kültürde büyütülebilseydi, sürekli olarak ihtiyaç duyulan tek antikoru üreten bir kaynak oluştururlardı. Ancak burada iki temel sorun vardır: Spesifik antikoru üretebilmek için hücrelerin diğer hücrelerden ayrıştırılması ve çoğaltılması gerekir. Gerçek klonlama yönteminde, önce ikinci dereceden problem çözülür. Unutulmamalıdır ki normal hücreler yaşlanan ve belirli sayıda bölünme geçirerek ölen hücrelerdir, oysa kanser hücreleri ölümsüzdür.
Bu nedenle, lenfositler kanserli hale gelirse, bu hücreler süresiz olarak çoğalır. Bu nedenle, deneyin bu noktasında prosedür, karışık lenfositlerden alınan hücreleri kanserli B hücreleriyle kaynaştırmaktır. Kanser hücreleriyle başarılı bir şekilde kaynaşan hücreler ölümsüz hale gelir ve hibridoma hücreleri olarak adlandırılır.
Ancak yine de seçim sorunu var. Önce hibridoma hücreleri seçilmeli, diğer hücreler elenmeli ve ardından istenen antikoru üreten hücreler seçilmelidir. Silme işlemi nispeten basittir. Farelerde hibritleşmeyen lenfositler, belirli sayıda bölünmeyi tamamladıklarında fiilen ölürler. Milstein ve Köhler’in hibritleşmeyen C-hücreli lenfoma hücrelerini ayırt etme konusunda daha büyük bir sorunu var. Anahtar sentetik yollarından birini kaybetmiş bir hücre dizisi kullanarak çözdüler. Bu kanser hücreleri, kendi üretemeyecekleri bir maddeyi içermeyen bir büyüme ortamında kültürlendiklerinde ölürler.
Sonuçta sadece hibridomalar yani kanser hücrelerinden aldıkları genlerle ölümsüzleştirilmiş ve fare hücresinden gelen gen ile ortamda bulunmayan besinleri sentezleyebilen hücreler yaşamaya devam eden hücrelerdir. Bundan sonraki adımlar şunlardır: Her bir hibridoma hücresini mümkün olduğunca ayırmak ve tek tek kültürleyerek çoğaltmak ve her kültürü antijen ilavesiyle test etmektir. Bu hücre kültürlerinden hangisi istenilen antijene özgü antikor üretirse üretsin, antikorun antijene bağlanmasıyla oluşan kümeler o kültür kabında gözlenecektir.
Bu hücreler artık kalıcı, sürekli bir antijene özgü antikor kaynağı üretmek için daha fazla kültürleniyor. Son zamanlarda, araştırmacılar gerçek bir güç aktarımı olayı gerçekleştirdiler ve seçilen hibridoma hücrelerinden antikor genlerini bitkilere ve (lamda faj yardımıyla) Escherichia coli’ye naklettiler. Bu gelişme, antikorların daha hızlı ve daha ucuza elde edilmesini mümkün kıldı. Araştırmacılar belirli hücreleri, hücre iskeletlerini veya kimyasalları etiketlemek için monoklonal antikorlar kullanır. Bunun için, antikor partikülleri bir flüoresan boya, ferritin gibi elektron yoğun bir madde veya bir radyoaktif işaretleyici ile etiketlenir. İşaretli antikor hedefine ulaştığında, antijen ışık mikroskobu, elektron mikroskobu veya birkaç radyoizotop tahlilinden herhangi biri ile tanımlanabilir. Etiketli bir antikor, belirli kanser hücrelerini seçici bir şekilde yok etmek üzere tespit etmek için de kullanılabilir; Bir örnek, yumurtalık kanseri hücrelerinin ferritin konjuge antikorlarla etiketlenmesi ve ardından ferritine özgü T hücreleri tarafından yok edilmesidir. Sonuç olarak, monoklonal antikor teknolojisi hem temel bilim araştırmalarında hem de tıbbi uygulamalarda kullanım için büyük bir potansiyele sahiptir.
kaynak:
https://www.sciencedirect.com
yazar: bronzlaştırıcı tonik
Diğer gönderilerimize göz at
[wpcin-random-posts]