Bir poliklonal antikor (pAb), farklı B hücre suşlarından türetilen bir monoklonal antikor (mAb) grubudur. pAb düzeneğindeki her antikor, aynı antijen üzerindeki spesifik bir epitopa bağlanır, böylece spesifik bir antijene karşı duyarlılığı arttırır. Poliklonal antikor, aynı antijen üzerindeki çoklu epitopları tanıyan farklı B hücrelerinden oluşan bir antikor havuzunu temsil eder. Bu bireysel antikorların her biri, o antijen üzerindeki benzersiz bir epitopu tanır. Poliklonal antikorların avantajları ve dezavantajları vardır, bunlar aşağıdaki gibidir:
Avantajlar:
• Üretimi ucuz
• Dört aydan daha kısa sürede kullanıma hazır, hızla üretilen, saflaştırılmış antikorlar
• Gizleme kolaylığı
• Son derece kararlı ve pH veya tampondaki değişikliklere karşı toleranslıdır
• Çoklu epitopların tanınması nedeniyle antikorların antijene daha yüksek genel afinitesi
• Genel olarak, çoklu epitopları tespit etme yeteneği, daha sağlam tespit sağlar
• Birçok antikor, protein üzerindeki çoklu epitoplara bağlandığından, bir numunede düşük miktarlarda bulunan proteinleri tespit etmek için daha fazla hassasiyet sağlar.
• Sandviç ELISA’da antikor olarak idealdir. Hedef proteini hızlı bir şekilde yakalama yeteneği
• Antikorun daha yüksek afinitesi, genellikle hedef antijene daha hızlı bağlanmasıyla sonuçlanır. IP veya ChIP gibi hızlı protein yakalama gerektiren analizler için idealdir.
• Denatürasyon, polimorfizm veya konformasyonel değişiklikler gibi bireysel epitoplarda ince değişiklikler gösteren proteinleri test ederken önemli ölçüde daha sağlam.
• Çoklu test türlerinde doğal protein tespiti için üstün kullanım.
• Antikor markörleri ile konjuge edilmesi çok daha kolaydır. Bağlama yeteneğini etkilemesi olası değildir.
Negatifler:
• Farklı hayvanlarda farklı zamanlarda üretilen farklı gruplar arasındaki varyasyon
• Çoklu epitopların tanınması nedeniyle daha yüksek çapraz reaktivite potansiyeli
• Çapraz reaktiviteyi azaltmak için genellikle serumun afinite saflaştırması gerekir.
İçindekiler
Monoklonal antikor nedir?
Buna karşılık, bir monoklonal antikor, tek bir antikor üreten B hücresinden gelen antikoru temsil eder ve bu nedenle yalnızca bir epitopa bağlanır. Bir poliklonal karışımdaki her bir antikor, teknik olarak bir monoklonal antikordur; Bununla birlikte, terim genellikle gerçek B hücresinin izole edildiği ve ölümsüzleştirilmiş bir hibridoma hücre hattına dahil edildiği, böylece aynı antikorun büyük miktarlarının üretilebildiği bir prosesi ifade eder. Monoklonal antikorun avantajları ve dezavantajları vardır, bunlar aşağıdaki gibidir:
Avantajlar:
• Aynı antikordan büyük miktarlarda üretebilir. (ayrı toplu düzeltme)
• Bölüm başına yüksek gizlilik. (çapraz reaksiyon olasılığı daha düşüktür)
• Protein seviyesi ölçümü gerektiren analizlerde daha iyi sonuç verebilir.
Negatifler:
• Çok daha pahalı üretim.
• Hibrit klonlamayı üretmek ve geliştirmek çok daha uzun zaman gerektirir.
• Epitop yapısındaki ince değişiklikler genellikle monoklonal antikorun hedef proteini tespit edememesine neden olur.
• Üreme için daha sıkı saklama koşulları.
• Hücre kültürü ve saflaştırma yetenekleri gereklidir.
• Denatüre veya değiştirilmiş form durumunda bir proteini saptamak için daha az güç.
• Hedef proteinin hızlı bir şekilde yakalanmasını gerektiren bir uygulama için daha az idealdir.
• pH ve dielektrik koşullarına daha duyarlıdır.
• Ayrım yapıldığında bağlanma değişikliklerine karşı daha hassastır.
• Bu eksikliklerin birçoğunu telafi etmek için birkaç monoklonal antikordan oluşan bir havuz oluşturmak gereklidir. Bu genellikle çok pahalı ve zaman alıcıdır.
Poliklonal antikorların özellikleri
PAb’lerin heterojen doğası, mAb’lere kıyasla üretimlerinin nispeten ucuz olabileceği anlamına gelir. Yaygın bir üretim yöntemi, bir memeliye bir antijen adjuvanının birkaç ay boyunca birkaç kez enjekte edilmesini içerecektir. Bu, antijene karşı bir bağışıklık tepkisini indükler ve hayvanın kandan alınabilen IgG antikorları üretmesine neden olur. Daha yüksek antikor titreleri için genellikle keçi gibi daha büyük bir hayvan tercih edilir. Diğer üretim yöntemleri, gerekli antikorları büyük miktarlarda üretmek için memeli hücre dizilerinin kullanımını içerir. Alternatif olarak, bazı durumlarda doğrudan insan kan plazmasından elde edilebilir.
Farklı antikorlar, bir hedef proteinin farklı epitoplarına bağlanabildiğinden, pAb’ler, bir sandviç ELISA’daki bir immünolojik tahlilde proteinleri yakalamak için yararlıdır. Bu, testin hedef proteine duyarlılığını artırır. Çoklu antijenik epitopları bağlama yeteneği, pAb’lere hedefleri için daha yüksek bir genel afinite sağlar. Bu, tıbbi uygulamalarda etkinliğini artıran bir mAb’den daha hızlı hedefe bağlandığı anlamına gelir. Ayrıca, kromatin immünopresipitasyon gibi proteinlerin hızlı bir şekilde yakalanmasını gerektiren immünoanalizlerde de yararlıdır. Protein yapısı ısı, kimyasal denatürasyon veya yapısal değişiklikler nedeniyle tehlikeye girdiğinde, pAb’lerin hedefi bağlama olasılığı daha yüksektir. Bunun nedeni, hedef epitoplardan birinin hala yapısal olarak bozulmamış olabilmesidir.
pAb’nin heterojen karışımının bir dezavantajı, karışımın bileşiminin gruplar arasında farklılık gösterebilmesidir. Bu, karışımdaki farklı antikorların konsantrasyonuna bağlı olarak daha zayıf bir bağışıklık tepkisi anlamına gelebilir. Birden fazla farklı antikor, çok karmaşık bir yanıtı başlatan farklı tipte bağışıklık hücrelerini çekebileceğinden, herhangi bir indüklenmiş bağışıklık tepkisinin sonucunu tahmin etmek zordur.
tıpta kullanın
Biyokimyadaki kullanımlara ek olarak, pAb’lerin spesifik ilaçlar olarak çeşitli farmasötik kullanımları vardır. Tedavinin tek bir antikor veya bispesifik bir antikor kullanmaktan daha karmaşık olması gereken durumlarda bir immünoterapi olarak çalışabilir. Bazı aritmiler, özellikle atriyal fibrilasyon ve atriyal flutter olmak üzere genellikle digoksin ile tedavi edilir. Doz aşımı, muhtemelen yaşlı hastalarda başka birçok yan etkiyle birlikte aritmileri şiddetlendirir.
Digoksin immün fab (DIF), kardiyak glikozit toksisitesini tedavi etmek için kullanılabilen bir poliklonal antikordur. İlacın değiştirilmiş bir versiyonu ile aşılanmış koyunlardan elde edilen bir anti-digoksin IgG antikorundan oluşur. Digoksin, normalde kas hücrelerinin hücrelerinde düşük bir sodyum konsantrasyonu sağlayan Na/K ATPaz pompasına bağlanır. DIF, digoksini pompaya bağladığından daha yüksek bir afinite ile digoksini bağlar, böylece ilacın toksik etkilerini azaltır. Başka bir örnek, Rh hastalığını önlemek için kullanılan bir pAb olan rozolimupab’dır. Annenin D antijenine karşı antikorları fetüste negatif bir bağışıklık tepkisi başlattığından, bazı RhD-negatif kadınlardan doğan bebeklerde bu durum meydana gelebilir. Rozrolimupab, 25 benzersiz anti-D IgG antikorundan oluşur ve bu varyasyon, hastalığa karşı doğal insan tepkisini daha yakından kopyalamasına izin verir. Genellikle hamilelik sırasında ve RhD pozitif biyolojik ebeveynleri olan RhD negatif kadınlarda doğumdan sonra önleyici bir önlem olarak kullanılır. Rozrolimupab’ta kullanılan tek antikor mAb, CHO hücrelerinden türetilir ve tekrar üretilebilir ve özgüllükle yüksek miktarlarda üretilebilir. Plazma türevli pAb’lere benzer etkinlik sağlarlar ve daha güvenli ve daha tolere edilebilir oldukları gösterilmiştir.
Bu nedenle, poliklonal antikorların uygulanmasına ilişkin daha fazla araştırma, pAb’lerin daha karmaşık bir bağışıklık tepkisi başlatmaya veya vücutta çok düşük bir seviyede bulunan bir substrata bağlanmaya yardımcı olabileceği çeşitli karmaşık hastalıkların saptanmasına yardımcı olabilir. pAb’ler, profilaktik veya profilaktik bir ilaç olarak MERS-CoV’ye karşı potansiyel bir araç olarak tanımlanmıştır. Mevcut çabalar, MERS-CoV’ye karşı pAb’lerin geliştirilmesine odaklanmaktadır ve 2016’da bir faz I klinik deneyi tamamlanmıştır. Bu, sığırdan türetilen pAb SAB-301’in insanlarda kullanım için güvenli olduğunu, ancak pAb’lerin mevcut COVID-19’da kullanımının güvenli olduğunu gösterdi. pandemi yakında olmayacak.Büyük olasılıkla bitmiş üründen yıllar sonra. Bununla birlikte, belirli viral enfeksiyonlara karşı poliklonal antikorların kullanımına ilişkin devam eden araştırmalar, gelecekteki MERS-CoV veya benzeri salgınlarda yararlı olabilir.
Monoklonal antikorlar, tek bir epitopa özgü büyük miktarlarda özdeş antikorlar gerektiren tanısal üretim ve terapötik ilaç geliştirme gibi uygulamalar için ideal bir çözüm olabilir. Bununla birlikte, genel araştırma uygulamaları için, poliklonal antikorların avantajları tipik olarak monoklonal antikorların sunduğu birkaç avantajdan daha ağır basmaktadır. Küçük antijen hedeflerine karşı serum afinitesini saflaştırarak, poliklonal antikorların avantajları daha da genişletilir.
kaynak:
https://www.creative-diagnostics.com/polyclonal-vs-monoclonal-antibodies.htm
yazar: Özlem Güvenç Ağaoğlu
Diğer gönderilerimize göz at
[wpcin-random-posts]