Deri greftlerini iyileştirmek için sürekli olarak yeni araştırmalar yapılmaktadır. Araştırmalara göre yeşil çay polifenolleri farelerin cildinin korunmasına etki ederek deri greftlerinin başarı oranını artırıyor. Deri greftleri ciddi yanık yaralanmaları, cilt bozuklukları ve cilt kusurlarının tedavisinde kullanılsa da, kullanımları bu tip greftler için çıkarılabilecek sınırlı miktarda normal deri ile sınırlıdır. Fonksiyonel yara kapama için en iyi greft otogrefttir. Otogreft prosedürünün sonunda, kalan donör cildi rutin olarak salin içinde saklanır. Ameliyat sonrası greft kaybı olduğunda veya yüzeysel yara bozulması oluştuğunda açık yaraya uygulanır. Bununla birlikte, salamurada uzun süreli depolama zayıf tozlaşmaya yol açar.
Ayrıca araştırmacılardan deniz araçlarının depolama ömrünü uzatacak diğer koruma ortamlarını da incelemeleri istendi. Son zamanlarda yeşil çayda bulunan polifenollerin kan damarları, kornea, sinirler, adacık hücreleri, eklem kıkırdağı ve kalp kası gibi dokuların oda sıcaklığında korunmasını desteklediği bulunmuştur. Bu sonuçlar, yeni bir doku bankası dondurma yöntemi olasılığını ortaya çıkarıyor.
Daha önce bahsedildiği gibi, kanın yeniden akışı üzerine hücre zarındaki lipitlerin peroksidasyonuna yol açan iskemi kaynaklı serbest radikallerin bir sonucu olarak taşıma bozulur. EGCG’nin (epigallocatechin gallate) peroksilipid oluşumunu önlediği söylenir. Geleneksel hücre kültürü ortamına EGCG eklenmesinin saklanan deri greftlerinin canlılığını artırmanın yanı sıra saklama süresini uzatıp uzatmayacağını belirlemek için fare derisi kullanılarak bir çalışma yapılmıştır. Bu çalışma için seçilen saklama solüsyonu, Dulbecco’nun Modifiye Eagle Medium, %10 Fetal Calf Serum, Supplement ve %1 Antibiyotik Solüsyonunu içermektedir. EGCG, 1 mg/mL’lik bir nihai konsantrasyonda bir depolama solüsyonunda çözündürüldü.
Anestezi için GFP transgenik farelere intraperitoneal olarak pentobarbital (50 mg/kg) uygulandı. Farelerin sırtları tıraşlanıp alındıktan sonra sırt derilerinden biyopsi alındı ve deri biyopsilerinden kas tabakaları sıyrıldı. 1 x 1 cm ölçülerindeki deri örnekleri, 4 ve 37 hpf’de 50 mL koruma solüsyonu içeren steril kaplarda 8 haftaya kadar saklandı. Periyodik olarak, çıplak farelere aşılama için korunmuş derinin bir bölümü (30 dakikalık, 1, 2, 4, 6, 7, 8 haftalık) kullanıldı veya doğrudan histolojik olarak incelendi. 4′ koruyucu cildin histolojik incelemelerinde, epidermal tabakada hafif bir dejenerasyon olduğu gibi, ikinci hafta boyunca EGCG olmayan ciltte GFP değerinde bir düşüş gözlendi. Epidermal ve dermal tabakaların dejenerasyonu 4; Tüm gruplarda beşinci haftadan itibaren kayıtlar yapılmıştır.
Korunan derilerin çıplak farelere aşılanmasından 4 hafta sonra meydana gelen, otuz dakika boyunca EGCG ile korunan deride saçlar kalmıştır. EGCG (b) içermeyen deride ise saç yoktur ve greft boyutu EGCG gruplarına göre daha küçüktür. 4 °C’de EGCG ile 2 haftalık korumanın ardından greft rengi nekroz kadar koyuydu ancak geriye sadece EGCG kaldı. 2 haftalık korumadan sonra EGCG ile 4 yaş altı koruma hariç tüm gruplarda greft boyutu küçüldü veya sadece skar görüldü. EGCG ile 30 dakikalık korumadan sonra çıplak farelere aşılanan farelerin derisi, EGCG’siz nakledilenlere göre daha iyi bir durum, yani saç dökülmesi ve geri çekilme gösterdi. Korunmuş EGCG gruplarında cilt koyu renkli ve yüzeysel olarak nekroz varmış gibi görünüyordu ancak renk değişikliğinin EGCG varlığına bağlı olduğu görüldü. 4 EGCG’de 2 ila 7 haftalık bakımdan sonra, iyi bir greft sağkalımı vardır. Diğer gruplarda, greftler büzülme, reddedilme veya sadece yara izi nedeniyle küçülmüştür.
Histolojik analizde, EGCG ile korunan 4 greftin, hem epidermal hem de dermal tabakalar sağlam kalacak şekilde tamamen eksize edildiği bulundu. Öte yandan, EGCG’siz 4’te tutulan greftlerde GFP-pozitif keratinositler veya fibroblastlar ve dermal tabakada sadece makrofajlar gözlenmedi. Tutulan 37 kohortta EGCG’li veya EGCG’siz hiçbir GFP-pozitif fare hücresi gözlenmedi. 37 korunan greftten (EGCG’li veya EGCG’siz) hiçbiri başarılı olmadı. Ancak, 4 korunmuş greft kabul edildi ve EGCG ile tedavi edilen greftlerin başarı oranı, 4 haftalık korumadan sonra bile %100 idi.
Yanık travmasının neden olduğu ciddi cilt kusurları deri greftleri ile kapatılmalıdır, ancak bazen hematom gibi çeşitli nedenlerle deri greftleri başarısız olur. Deri greftleri kısmen başarısız olduğunda, korunmuşsa birincil greftten kalan deri kullanılarak küçük deri kusurları onarılabilir. Ayrıca karmaşık laserasyonlara veya küçük flep benzeri yaralanmalara neden olur. Bu gibi durumlarda deri geçici olarak korunabiliyorsa yara durumu düzeldikten sonra greftin bir parçası olarak kullanılabilir. Dondurularak kurutulmuş domuz derisi, egzotik greftler ve donmuş allogreftler de yara sargısı için kullanılır, ancak genellikle kalıcı olarak dahil edilmezler. Bu nedenle, otogreftleri korumak için daha iyi teknikler geliştirmek çok faydalıdır.
EGCG’nin korneayı, kan damarlarını, sinirleri, pankreatik adacık hücrelerini, safen damarları ve periferik sinir sistemini koruduğuna dair birkaç rapor vardır. Bildirilen ilk denemede histolojik inceleme, EGCG’nin bir deri örneğinin korunma süresini iyileştirdiğini ortaya koydu. Zamanla deri örnekleri epidermal tabakadan dermal tabakaya doğru bozulmaya başlar. 4’te korunan deri numuneleri, 37-37’dekilere göre daha az bozulmaya uğramış gibi görünüyordu. Ancak, hücre canlılığını yalnızca histolojik incelemelere dayanarak yargılamak zordur, çünkü GFP hala tüm deri numunelerinde mevcuttur. Bu nedenle, deri örneklerinin canlılığı, örneklerin başarılı greftlere yol açıp açmadığı incelenerek doğrulandı. Nekrotik doku veya derinin reddi, nakilden yaklaşık iki hafta sonra bildirilmiştir.
Bağışıklık yetmezliği olan fareler, alıcı hayvanlar olarak kullanıldı ve GFP-Tg farelerinden alınan deri aşılarının başarısı değerlendirildi. Sonuçlar, EGCG eklense bile 37 ile cilt korumasının mümkün olmadığını gösterdi. Benzer şekilde, AE CRAM ve ark. İki hafta boyunca 4’te tutulan deri örneklerinin naklinden on gün sonra greftlerinin sadece 1/3’ünün başarılı olduğunu bildirdiler. Çalışmalarda, 4 hafta boyunca EGCG ile korunan derilerin 4 hafta implantasyonundan sonra 4 G başarılı olmuştur ve 3 EG’den 1’i, 4 hafta boyunca EGCG ile 7 hafta korunduktan sonra bile başarılı olmuştur. Bu nedenle EGCG’nin epidermal tabaka dejenerasyonunu azaltarak ve postoperatif greft büzülmesini baskılayarak deri örneklerinin korunmasında faydalı olduğu sonucuna varıldı.
EGCG’nin cilt korumasını geliştirmesinin birçok nedeni olabilir ve EGCG’nin güçlü antioksidan aktiviteleri vardır. EGCG’nin etkili antioksidan aktivitesi, korunmuş derinin hücre zarındaki lipidlerin oksidasyonunu önleyebilir. M Kapoor ve diğerleri. EGCG’nin in vitro anti-enflamatuar ve serbest radikal süpürücü etkileri olduğu ve ayrıca hücre bölünmesini kontrol ettiği bildirilmiştir. Bu etkilerin bir kombinasyonunun, korunan derinin durumunu iyileştirdiğine inanılmaktadır. Ayrıca iskele yapı takviyesi gibi
EGCG’nin antibakteriyel etkileri ve aktivitesi de koruyucu etkilerine katkıda bulunuyor gibi görünmektedir. EGCG ayrıca farelerde tam kat insizyonlardan sonra skar kalitesini iyileştirdi. Muhtemelen EGCG’nin iNOS (indüklenebilir nitrik oksit sentaz), COX-2 (siklooksijenaz-2) ve VEGF’nin (vasküler endotelyal büyüme faktörü) ekspresyonunu arttırması nedeniyle yeni kan damarları oluşur. EGCG’nin ayrıca arginaz 1 aktivitesini ve protein seviyelerini azalttığı gösterilmiştir. Bulgular, EGCG’nin donmaya karşı cilt koruması için gelecekteki klinik kullanım potansiyelini göstermektedir, ancak EGCG’nin yararlı cilt koruma etkilerini nasıl uyguladığının altında yatan mekanizma belirsizliğini koruyor.
Memeli dokularının ve organlarının polifenoller tarafından kriyokorunmasının olası mekanizmaları
Tüm çalışmalar, polifenollerin doku veya organların, özellikle sıçan pankreas adacık hücrelerinin fizyolojik olarak korunması için faydalı göründüğü gözlemine dayanarak başlatılmıştır. O zamandan beri, polifenollerin hücre koruması üzerindeki yararlı etkilerini gösteren kanıtlar birikmektedir. Bu gözlemi doku korunmasına ve hatta organ nakline kadar genişletmek, depolama solüsyonlarındaki polifenollerin konsantrasyonunu düzenleyerek daha uzun süre saklanmasını mümkün kılar. Son zamanlarda, polifenollerin fare akciğerlerinde iskemik/reperfüzyon hasarını azaltabildiği ve köpek akciğeri, sıçan aortu, sıçan periferik sinirleri ve meme pankreas adacık hücreleri dahil olmak üzere çeşitli dokuları veya organları koruyabildiği bildirilmiştir.
Memeli hücrelerinin, dokularının veya organlarının hazırda bekletme yoluyla bu donmayan korumasına, hücre çoğalması ve hayatta kalması için tersine çevrilebilir bir şekilde hücre çoğalması ve hayatta kalmasının düzenlenmesi aracılık edebilir. Bu hipotezle bağlantılı olarak, polifenollerin neden olduğu hibernasyon olayının, amfipatik özelliklerinden dolayı hücre zarı veya doku matrisi ile ilişkili olması gerektiği bildirilmiştir. Penetrasyon da dahil olmak üzere içsel özellikleriyle ilişkili olabileceği zaten bildirilmiştir. Polifenollerin proteinlerde emilimi erken üretilir, ancak emilim hızı çok yavaştır. Sonuç olarak, memeli hücreleri, dokuları veya organları, bileşiklerin zar proteinlerine ve hücre dışı matrislere alınması yoluyla fizyolojik olarak korunabilir.
Polifenoller, çeşitli hücre tiplerinin çoğalmasını kontrol edebildi ve adacık hücreleri, kan damarları, kıkırdak, kornealar, sinirler ve deri dahil olmak üzere çeşitli dokuların uzun süreli depolanması için çok faydalı olduğu gösterildi. Bugün ABD’de yılda yaklaşık 850.000 allojenik doku dokusu nakledilmektedir. Bu dokuların çoğu dondurularak saklanır. -196 derecede kriyoprezervasyon yöntemi Nisan 1999’da Tokyo Üniversitesi Hastanesi ve Osaka Ulusal Kardiyovasküler Merkezinde onaylandı. Kan damarları, kıkırdak ve derinin uzun süreli saklanması için kriyoprezervasyon yöntemleri kullanılmaktadır. Bununla birlikte, mevcut araştırmalar hala Wisconsin Üniversitesi solüsyonu gibi doku kültürü kriyoprezervasyon ve koruma sıvılarının etkinliğini artırmaya yöneliktir.
Burada, dokunun histolojik ve biyomekanik özelliklerinin mükemmel bir şekilde korunmasıyla, çeşitli dokuları donmaya karşı üç aya kadar korumanın artık mümkün olduğu bildirilmektedir. Ayrıca, sıçan siyatik siniri, kobay periodontal bağı ve kalp kası, korumadan önce uzun süreli depolama için donmamış bir durumda korunmuştur. Bu, ek bir antioksidan olarak polifenoller içeren yeni bir koruyucu sıvının geliştirilmesiyle mümkün olmuştur. Bu nedenle, birçok dokunun dondurularak saklanması, sonunda bunların yeni geliştirilmiş bir polifenol doku çökeltme sıvısında saklanması ile değiştirilebilir. Hücreleri ve dokuları korumaya yönelik bu yöntem, yalnızca Japonya’da değil, tüm dünyada büyük ilgi görüyor.
kaynak:
https://jeb.biologists.org/content/jexbio/29/3/454.full.pdf
https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0011224018
yazar: Özlem Güvenç Ağaoğlu
Diğer gönderilerimize göz at
[wpcin-random-posts]
İlk Yorumu Siz Yapın