Son zamanlarda, DNA parçalanma deneyleri, laboratuvar uygulamalarına geniş çapta entegre edilmiştir. Erkek gametler, hamileliğin erken dönemlerinde bile döllenme süreçlerine, embriyo kalitesine ve cenin gelişimine önemli ölçüde katkıda bulunduğundan, spermin DNA bütünlüğü ve genetik bilgisi yavru için çok önemlidir. Sperm, erken embriyonik gelişim sırasında aktif olan proteinleri kodlayan yaklaşık 3.000 farklı tipte mRNA içerir. Henüz bilinmeyen ve yumurtada karşılığı olmayanlar da vardır.
sperm seçimi
ICSI’nin rutin bir prosedür olarak tanıtılmasından bu yana, sperm konsantrasyonu ve hareketliliği artık tek bir sperm hücresinin enjekte edilmesi gerektiği kadar önemli olmadığından, standart semen analizinin önemi ihmal edilmiştir. Standart ICSI prosedürünü bir Hoffman modülasyonlu kontrast mikroskobu veya Nomarsky optiği altında × 400 büyütmede gerçekleştirirken, sperm başının orta ve kuyruk kısmının (boyut ve şekil) görselleştirilmesi ve değerlendirilmesi mümkündür, ancak kesin morfolojinin incelenmesi alt yapı sınırlıdır.
Konvansiyonel ICSI uygulanırken, ayrıntılı yapısal profillerine dayalı olarak morfolojik olarak normal spermleri değerlendirmek ve seçmek zor olacaktır. Deşarj, diyafram kalınlığı, orta parçanın kalınlığı veya deformasyonu vb. Daha yüksek sperm başı akıntısının, daha yüksek DNA fragmantasyonu ve anöploidi oranı ile ilişkili olup olmadığı ve embriyo kalitesi ve implantasyon sonrası gelişim üzerinde olumsuz etkileri olup olmadığı ve erken gebelikte daha yüksek gebelik kaybı sıklığı olup olmadığı tartışmalıdır. Ancak bazı çiftler için detaylı sperm muayenesinden önce ICSI tercih edilmektedir.
Morfolojik olarak seçilmiş sperm enjeksiyonu (IMSI), sperm morfolojisinin değerlendirilmesinde bir mihenk taşıdır. Hareketli Sperm Organel Morfoloji Çalışmasına (MSOME) dayalı olarak IMSI, intrasitoplazmik enjeksiyon için hareketli ve morfolojik olarak normal spermi seçmek için kullanılan tek gerçek zamanlı kontamine olmayan yöntemdir. IMSI ilk olarak Baratoov ve arkadaşları tarafından tanıtıldı. MSOME, ters ışık yayan bir mikroskop, diferansiyel kontrast kontrastı veya Nomarski diferansiyel kontrast kontrast optiği ve × 6600 ila × 13000 arasında değişen yüksek büyütmelerde bir dijital kamera altında seçilir. MSOME kriterleri kullanılarak, hareketli sperm fraksiyonu ve her bir hücresel anormallik değerlendirilir. Akrozom plakası, akrozom sonrası plaka, boyun, mitokondri, kuyruk ve çekirdekten oluşan altı organelin morfolojik durumuna göre. İncelenen örneklerdeki spermlerin sadece %33’ü bu kriterlere göre morfolojik olarak normaldi.
Her alan için belirli kusurlar şunlardır:
• Akrozomal bölge – eksik, kısmi veya vesiküler.
• Akrozom sonrası lamina – yok veya vesiküler.
• Boyun – intravenöz sitoplazmik damla.
• Mitokondri – eksiklik, kısmi, bozukluk.
• kuyruk – eksik, eğri, kırık, çok, kısa;
• Çekirdek – küçük veya büyük oval, dar, geniş veya kısa, bölgesel düzensizlik, vakuoller nükleer alanın %4’ünden fazlasını kaplar. Ancak hareketli spermin değerlendirilmesi farklı bilim adamları tarafından farklı şekillerde belirlenebilir.
Hareketli spermlerin yüksek büyütme altında gerçek zamanlı gözlemlenmesinde en önemli şey, sperm hücresi başının sayısı, boyutu ve yerleşimindeki vakuollerin varlığının değerlendirilmesidir. Vakuollerin kesin kaynağı hala bilinmemektedir, ancak farklı hipotezler, bunların sperm olgunlaşması sırasında spermatogenezin erken aşamalarından kaynaklandığını ve vakuollerin alanı nedeniyle sayılarının arttığını göstermektedir. Diğer çalışmalar, spermde vakuol oluşumunun kuluçka ve ejakülasyondan sonraki yoğunlaşma döneminde başladığını göstermektedir.
Bununla birlikte, sperm başındaki yüksek vakuoller veya büyük vakuoller, artan DNA parçalanma oranları ve artan kromatin olgunlaşmamışlığı ile ilişkili olabilir ve fertilizasyon ve gebelik oranlarını etkileyebilir. Sperm morfolojisinin değerlendirilmesi, sperm seçimi için doğru bir oran sistemi olarak Cassuto ve Barak skoruna dayandırılabilir. Sonucu oluşturmak için altı sperm varyantı dikkate alınmıştır: baş, akrozom, vakuol, baz, insert ve sitoplazmik damlacık (“HAVBIC”). Baş, vakuol ve taban, anormallikler için ana kriterler olarak kabul edildi ve spermatogenezin değerlendirilmesinde, korpüsküler damlacık, insersiyon ve sitoplazmik damlacık ikincil kriterler olarak kabul edildi. Aşağıdaki denklem geliştirilmiştir:
Spermatozoanın S çekirdeği = (2 × Baş) + (3 × Vakuol) + (1 × Baz) Spermatozoa puanı = 2 × Kafa + 3 × Koful + 1 × Baz E1
Formüle bağlı olarak, sperm hücrelerinin skoru 0 ila 6 arasında değişebilir ve kaliteye göre üç grup ayırt edilir:
• Sınıf 1 – yüksek kaliteli sperm (derece 4-6)
• Sınıf 2 – orta kalitede sperm (1-3. derece)
Sınıf 3 – düşük kaliteli sperm (derece 0)
ICSI ile karşılaştırıldığında IMSI ile artan gebelik oranlarını gösteren ilk makalelere dayanarak, yöntem, zaman alıcı bir teknik olmasına rağmen, kullanıma sunulduğundan bu yana laboratuvar uygulamalarına geniş ölçüde entegre edilmiştir.
Hareketli spermin yüksek büyütme altında değerlendirilmesi, yüksek oranda parçalanmış spermatogonia anöploidisi, ciddi oligospermi veya oligospermi ve/veya tritozoospermi, tekrarlayan implantasyon başarısızlığı veya tekrarlayan erken düşük öyküsü, ileri kadın yaşı, Erkek yaşı olan hastalar için uygundur. Sonraki çalışmalar, erkek faktörü kısırlığı olan hastalarda daha iyi sonuçlar elde etmek için sperm morfolojisini değerlendirmeye yönelik yeni yöntemin önemi hakkında daha fazla analiz ve bilgi sağladı.
IMSI prosedürünün in vitro döngü sonuçları üzerindeki etkisine ilişkin hala tartışmalı çalışma sonuçları bulunmaktadır. Bununla birlikte, uygulanmasına fayda sağladığı görülen şey, sperm morfolojisi ve işlevinin daha iyi anlaşılmasıdır.
Genetik ve sperm sayısı
Y kromozomunun silinmesi, azospermi, oligospermi (düşük sperm sayısı) veya anormal sperm morfolojisi ve hareketliliği ile ilişkilidir. AZFa ve AZFb delesyonları tespit edildiğinde, testiküler sperm eldesi etkili olmayacaktır, ancak AZFc delesyonları olan çoğu erkek için başarılı bir seçenektir. Normal bir gebelik ve Y-küçük delesyon iletimi bildiren bir vaka vardır. Y bağlantılı bir şekilde kalıtılan Y kromozomu kısırlığını teşhis ederken ve değerlendirirken, hastalar bir genetikçi ile gelecek nesillerde kısırlığa neden olabilecek spesifik genetik durumlarını tartışmalıdır.
TESE seçeneği için taranabilecek başka bir gen, testisle ifade edilen gen 11’dir (TEX 11). Çalışmalar, TEX11’in (X kromozomu ile ilişkili mayoz geni) azospermik erkeklerde mutasyona uğradığını göstermektedir. Bu hastalarda sperm eldesi mümkün değildir. Konjenital bilateral vas deferens (CBAVD) yokluğu ve semende sperm hücresi yokluğu, TESE veya PESA ve ardından ICSI ile değiştirilebilir. CBAVD, kistik fibrozis transmembran iletim düzenleyici (CFTR) genindeki mutasyonlarla ilişkili olduğundan, çiftler çocuk sahibi olma riski altında olduğundan, genetik testlerden ve durumu kontrol eden prosedürlerden önce danışmanlık alınmalıdır. (kistik fibroz)
Sonuç olarak, doğurganlık tedavisinin bir parçası olarak genetik danışmanlığın yanı sıra prenatal genetik tanı (PGD) veya preimplantasyon genetik tarama (PGS) önerilmelidir.
kaynak:
https://news.mit.edu/1996/sperm-0612#
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4009560/
yazar: Özlem Güvenç Ağaoğlu
Diğer gönderilerimize göz at
[wpcin-random-posts]
İlk Yorumu Siz Yapın